活性測(cè)定
簡(jiǎn)要描述:超氧化物歧化酶(SOD)是一種廣泛存在于生物體內(nèi)的金屬酶,作為重要的氧自由基清除劑,能催化超氧化物陰離子發(fā)生岐化作用,生成 H2O2 和 O2。SOD 不僅是超氧化物陰離子清除酶,超氧化物歧化酶試劑盒也是 H2O2主要生成酶,在生物抗氧化系統(tǒng)中具有重要作用。活性測(cè)定是檢測(cè)生物酶活性的試劑盒
產(chǎn)品型號(hào):
所屬分類:氧化與抗氧化系列
更新時(shí)間:2021-12-01
廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
品牌 | BOXBIO/盒子生工 | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
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應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,食品,生物產(chǎn)業(yè),制藥 | 檢測(cè)設(shè)備 | 可見分光光度計(jì) |
可檢測(cè)樣本數(shù) | 25 Samples | 主要檢測(cè)設(shè)備及配套 | 可見分光光度計(jì)/1 mL玻璃比色皿(d=10 mm) |
預(yù)計(jì)測(cè)定時(shí)間 | 3 h (25 Samples) | 試劑儲(chǔ)存條件 | 按照標(biāo)簽要求儲(chǔ)存 |
需自備試劑 | 無(wú) | 檢測(cè)方法 | XOD-NBT |
檢測(cè)波長(zhǎng) | 560 nm | 信號(hào)響應(yīng) | 遞減型 |
由于酶具有高度的專一催化活性,故可通過(guò)測(cè)定其相應(yīng)的底物或產(chǎn)物濃度變化,或用某一反應(yīng)產(chǎn)物或反應(yīng)物濃度變化來(lái)確定其酶的活性。一般采用電化學(xué)和光物理的方法,即利用反應(yīng)物或產(chǎn)物的吸光性,用紫外分光光度法或熒光法測(cè)定。若酶反應(yīng)過(guò)程中產(chǎn)物或反應(yīng)物有氣體,則可用測(cè)壓儀(瓦氏呼吸儀)測(cè)定。若反應(yīng)過(guò)程中生成酸,則可用電化學(xué)法。用同位素標(biāo)記的底物則可用放射化學(xué)法測(cè)定底物濃度變化,計(jì)算酶活性。一些性質(zhì)穩(wěn)定的酶,也可用高效液相色譜法檢測(cè)。
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超氧化物歧化酶(SOD)是一種廣泛存在于生物體內(nèi)的金屬酶,作為重要的氧自由基清除劑,能催化超氧化物陰離子發(fā)生岐化作用,生成 H2O2 和 O2。SOD不僅是超氧化物陰離子清除酶,也是H2O2主要生成酶,超氧化物歧化酶試劑盒在生物抗氧化系統(tǒng)中具有重要作用。活性測(cè)定是檢測(cè)生物酶活性的試劑盒
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XOD反應(yīng)系統(tǒng)能夠產(chǎn)生超氧陰離子(O2 -),O2-可還原氮藍(lán)四唑生成藍(lán)色甲臜, 產(chǎn)物在560nm處具有特征吸收峰;SOD可清除O2-,從而抑制了甲臜的形成,反應(yīng)液顏色越深,表明SOD活性愈低,反之活性越高,通過(guò)吸光值的變化即可表征SOD的活性。
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活性測(cè)定測(cè)定過(guò)程中所需要的儀器和試劑:可見分光光度計(jì)、1 mL玻璃比色皿(光徑 10 mm)、研缽/勻漿器、可調(diào)式移液器、臺(tái)式離心機(jī)、恒溫水浴/培養(yǎng)箱和蒸餾水。
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注意事項(xiàng):
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①抑制百分率應(yīng)在30-70%范圍內(nèi),越靠近50%越準(zhǔn)確;若抑制百分率小于30%或大于70%,則需要調(diào)整樣本量后重新測(cè)定:若抑制百分率偏高,則需適當(dāng)稀釋樣品;若抑制百分率偏低,則需適當(dāng)增加樣本量后再進(jìn)行測(cè)定,計(jì)算時(shí)相應(yīng)調(diào)整;
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②待測(cè)樣本和試劑二使用時(shí)在冰上放置;
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③樣本較多時(shí)可按表格中試劑用量配置工作液(包含試劑一、二、三),試劑五必須最后加入;
注: 為保證結(jié)果準(zhǔn)確且避免試劑損失,測(cè)定前請(qǐng)仔細(xì)閱讀說(shuō)明書(以實(shí)際收到說(shuō)明書為準(zhǔn)),確認(rèn)試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備是否充分,操作步驟是否清楚,且務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異交的樣本進(jìn)行預(yù)測(cè)定,過(guò)程中問(wèn)題請(qǐng)您及時(shí)與工作人員聯(lián)系。
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